米兰官网-【AACR 2025】上细前沿突破四

      【AACR 2025】上细前沿冲破四 | TCE焦点平台：基在抗CD3与肿瘤特异性靶点的纳米抗体库为精准免疫医治提供焦点东西 2025-05-15

4月25日-30日，备受存眷的美国癌症研究协会（AACR）年会于美国芝加哥召开，本届集会以 同一癌症科学与医学：连续立异带来厘革 为主题。秉持 疗效为核，黎民可和 的药物开发理念，上海细胞医治集团连续鞭策JL-闪CAR-T 为焦点的要害技能平台开发，实现原创非病毒载体基因写入技能、纳米抗体VHHMAb 技能等底层技能的连续冲破，加快立异医治药物开发进程。本次集会，集团共有5项最新研究结果获邀现场展示，笼罩从底层平台冲破到上风抗体发明，再来临床运用转化的完备药物开发系统。充实揭示了集团于改造CAR-T等立异细胞药物可和性及治愈性方面的前瞻结构和广漠远景。

上海细胞医治集团与其美国子公司Chantibody（CHANTIBODY THERAPEUTICS INC.）基在第四代纳米抗体VHHMAb 平台开发并初次展示了一系列抗CD3以和肿瘤特异性靶点的纳米抗体（VHH），这些抗体于联合方式、亲及力、激活T细胞的能力以和针对于多种肿瘤抗原TAA（例如CDH17, BCMA, CD19）的差别布局域上均体现出显著多样性，可实现高效、可模块化的TCE设计。

此中CT224作为全VHH双特异性TCE，依附其份子小、易拼接、多表位笼罩的怪异上风，有望为CRC等CDH17阳性实体瘤带来更高效、更安全的医治方案。

择要号：5465

择要标题问题：

A novel CD3 VHH-based multi-specific T cell engager platform and multiple leads for colorectal cancer and auto-i妹妹une diseases

择要内容：

T细胞毗连器（TCE）作为新一代免疫医治药物，揭示出于癌症以和自身免疫病等疾病医治中的巨年夜潜力。但开发历程中仍面对抗体筛选、T细胞激活水平与医治窗口等多重挑战。为了更年夜水平的开发TCE的潜力，咱们乐成使用具备自立常识产权的第四代VHHMAb 平台，从抗原免疫中乐成发明了一系列抗CD3以和肿瘤特异性靶点的纳米抗体（VHH），这些抗体于联合方式、亲及力、激活T细胞的能力以和针对于多种肿瘤抗原（TAA）的差别布局域上均体现出显著多样性。经由过程多源免疫计谋（羊驼、美洲驼及骆驼）举行细胞+卵白+mRNA免疫，捕捉了全谱的抗体候选份子，进一步借助自立研发的AI平台举行份子设计优化，得到了多样化的低免疫原性的人源化抗CD3 VHH以和肿瘤特异靶点（例如CDH17, BCMA, CD19）。

VHHMAb 平台开发多样化抗CD3 VHH库：从约10,000个ELISA联合克隆中筛选抗CD3 VHH，测定其亲及力跨度从 nM 至数百 nM，并按照联合动力学分入差别 binding bin ，进一步于T细胞外貌联合试验（FACS）中评估每一个VHH的联合强度，乐成得到了多样化人源化低免疫原性的抗CD3 VHH库，涵盖了CD3复合物的差别表位、亲及力和T细胞激活特征，为TCE构建提供了富厚候选资源（图1）。

Figure 1. (A) VHHs discovery funnel starting from around 10,000 ELISA binding clones. (B) Affinity of anti-CD3 VHHs ranging from nM to hundreds of nM, and are categorized into different binding bins (8 hit examples shown). (C) Binding profiles of anti-CD3 VHHs to T cells. (D, E) T cell activation in a TCE format with antigen-positive (D) and antigen-negative (E) cells. Identified anti-CD3 VHHs display varying T cell activation potencies.

VHHMAb 平台开发多样化抗CDH17 VHH库：结直肠癌（CRC）靶点有限，CDH17于CRC中差异高表达，是优选的肿瘤相干抗原之一。选择CDH17作为靶点，经由过程VHHMAb 平台，得到了针对于差别CDH17布局域（Domian1-Domain7）的VHH库。

Figure 2. (A) CDH17 is overexpressed in tumors and loses its polarized distribution seen in healthy intestines. (B) VHHs discovery funnel starting from around 4000 ELISA binding clones. (C) Affinity of anti-CDH17 VHHs ranging from nM to pM. (D) CDH17 consists of 7 extracellular domains EC1-EC7. (E) Selected VHHs covering all 7 domains of CDH17 and are cross-reactive with human, cyno, and mouse CDH17.

构建CT224（CDH17 CD3双特异性TCE）：使用自立AI平台对于差别CD3及CDH17 VHH组合举行空间构象模仿与生物物理属性猜测，优化份子巨细、柔性搭钮及Fc构象以促成免疫突触形成。（图3）

Figure 3. VHHs with different CDH17-domain binding and CD3 potency are used to design the CT224 TCEs. For optimal synapse and good developability, ML/AI powered designs are used.

CT224候选份子的多维功效验证与候选药物筛选：经由过程体外TDCC筛选，于CDH17高表达（H716）、中表达（DLD-一、COLO-205）和低/阴性（HCT-15）多株肿瘤细胞系中，测定差别CT224 TCE的剂量依靠性细胞杀伤率，并确认膜近端域（MP）靶向份子优在膜远端域（MD）份子（图 4）。

Figure 4. (A) Screening for potent CT224 by TDCC assay. (A.1) Range of cytolysis by different TCEs with CDH17 high (H71三木SEO-6) cells. (A.2) TCEs targeting membrane proximal (MP) domains showed higher killing capacity than the membrane distal (MD) domains. (B-E) Leads CT224A/B/C were selected for further validation. Leads have broader killing of CDH17 positive cells H716(B), DLD-1 (C) and COLO-205 (D) and no cytotoxicity on CDH17-low/negative HCT-15 (E).

CT224候选药物的人源化小鼠模子验证：于PBMC 人源化MHC dKO NOG小鼠AsPC-1异种移植模子中，CT224C（2 mg/kg，每一周i.p.一次）较临床参比ARB202（5 mg/kg，等摩尔浓度）显著按捺肿瘤生长（淫乱p 0.001），且动物体重不变，无较着毒性旌旗灯号（图 5A B）。

Figure 5. PBMC humanized MHC dKO NOG mice bearing AsPC-1 tumors were treated intraperitoneally (i.p.) once weekly (QW) with 2 mg/kg CT224C and 5 mg/kg ARB202 (equimolar). (A) Body weight and (B)Tumor volume were monitored twice a week, calculated by a two-way ANOVA test, 淫乱p 0.001.

结论：

1. 全谱系、全流程、高通量抗体发明及革新：从克隆筛选、AI驱动设计到多维功效验证，一站式实现抗CD3与抗TAA VHH的模块化整合与最优TCE设计。

2. 矫捷可调的Potency：经由过程差别亲及力与表位抗CD3 VHH组合，可为差别临床需求精准定制TCE激活强度与安全窗口。

3. 跨物种无缝跟尾：候选份子兼容人源/猕猴/小鼠CDH17，为小鼠到NHP临床前研究和IND申报提供名贵上风。